Питательные картонные подложки
Питательные картонные подложки (сокращенно ПКП) - это питательные среды в сухой форме, готовые к использованию для микробиологического анализа фармацевтических и косметических препаратов, воды, напитков, продуктов питания. В сочетании с методом мембранной фильтрации ПКП являются быстрым, точным и эффективным решением проблемы контроля сырья и продукта на различных стадиях производственного процесса. Они удачно дополнят оснащение Вашей лаборатории.
Питательные подложки валидированы для анализа жидких сред и воздуха в соответствии с GMP, обеспечивая безопасность и эффективность использования. Каждая партия ПКП контролируется внутренним аудитом фирмы (на стерильность, рН и по параметрам микробиологического роста) и сопровождается сертификатом качества.
ПКП представляют собой картонные диски толщиной 1 мм и диаметром 50 или 47 мм, импрегнированные питательными веществами и простерилизованные. После смачивания 3,0-3,5 мл стерильной или деминерализованной водой подложки готовы к использоанию.
Все типы ПКП поставляются с соответствующими стерильными мембранными фильтрами из нитрата целлюлозы. Стандартная упаковка содержит 100 фильтров и 100 стерильных картонных подложек, каждая из которых помещена в отдельную одноразовую полистирольную чашку Петри диаметром 56 мм. Для удобства при количественном подсчёте фильтры снабжены специальной сеткой с квадратами по 3.1х3.1 мм, которая не оказывает негативного влияния на рост микроорганизмов.
Достоинства ПКП
Экономичность - ускоряют проведение анализа, так как нет необходимости в подготовке питательной среды и стерилизации. После смачивания 3,5 мл стерильной воды ПКП готова к использованию.
Простота и эффективность использования - ПКП сразу готовы к использованию, они также могут быть использованы в лабораториях, не имеющих обширного микробиологического оборудования. Стерильная вода для смачивания подложек может быть подготовлена простым способом – при помощи дозирующего шприца Sartorius с прикрепленной к нему оправой шприцевого фильтра (0.2мкм). Мембранный фильтр обеспечивает эффективное задержание и оптимальные условия роста колоний.
Неизменное качество и точные результаты - В течение производства, каждый тип питательных подложек сравнивается с соответствующей агар средой относительно свойств роста, что гарантирует неизменное качество и воспроизводимые результаты. Обеспечивается стандартными условиями приготовления среды; только на мембранном фильтре со специальной сеткой можно точно подсчитать выросшие колонии. Мембранные фильтры с выросшими колониями - прекрасные документы для протоколирования результатов анализа всегда у Вас под рукой.
Безпроблемное хранение - срок хранения от 9 до 24 месяцев в зависимости от типа среды, при комнатной температуре.
Многосторонность – питательные картонные подложки могут варьироваться добавками к раствору, например: пивное сусло или оранжевая сыворотка способствует с помощью добавки 5% этанола росту бактерий уксуснокислых бактерий.
Простота и эффективность использования - ПКП сразу готовы к использованию, они также могут быть использованы в лабораториях, не имеющих обширного микробиологического оборудования. Стерильная вода для смачивания подложек может быть подготовлена простым способом – при помощи дозирующего шприца Sartorius с прикрепленной к нему оправой шприцевого фильтра (0.2мкм). Мембранный фильтр обеспечивает эффективное задержание и оптимальные условия роста колоний.
Неизменное качество и точные результаты - В течение производства, каждый тип питательных подложек сравнивается с соответствующей агар средой относительно свойств роста, что гарантирует неизменное качество и воспроизводимые результаты. Обеспечивается стандартными условиями приготовления среды; только на мембранном фильтре со специальной сеткой можно точно подсчитать выросшие колонии. Мембранные фильтры с выросшими колониями - прекрасные документы для протоколирования результатов анализа всегда у Вас под рукой.
Безпроблемное хранение - срок хранения от 9 до 24 месяцев в зависимости от типа среды, при комнатной температуре.
Многосторонность – питательные картонные подложки могут варьироваться добавками к раствору, например: пивное сусло или оранжевая сыворотка способствует с помощью добавки 5% этанола росту бактерий уксуснокислых бактерий.
Гарантия качества Sartorius
1. Полностью прослеживаемое документирование
Все идентификационные данные питательных картонных подложек Sartorius, такие как - тип, номер партии, дата стерилизации и срок годности напечатаны на этикетке, на каждой упаковке. По номеру партии имеется полная прослеживаемость данных по каждому шагу производственного процесса, использованным в производстве материалам и по процедурам тестирования. Все параметры входного продукта, условия производства, параметры испытаний документированы и подтверждены соответствующими сертификатами качества для каждой изготовленной партии продукции. Сертификат качества содержится в каждой упаковке продукции.
2. Сертификат DIN ISO
Система менеджмента качества фирмы Sartorius соответствует стандарту DIN EN ISO 9001, и сертифицирована Германской ассоциацией сертификации систем качества DQS.
3. Сертификат GMP
Производство и контроль качества питательных картонных подложек фирмы Sartorius AG полностью соответствует требованиям GMP.
Все идентификационные данные питательных картонных подложек Sartorius, такие как - тип, номер партии, дата стерилизации и срок годности напечатаны на этикетке, на каждой упаковке. По номеру партии имеется полная прослеживаемость данных по каждому шагу производственного процесса, использованным в производстве материалам и по процедурам тестирования. Все параметры входного продукта, условия производства, параметры испытаний документированы и подтверждены соответствующими сертификатами качества для каждой изготовленной партии продукции. Сертификат качества содержится в каждой упаковке продукции.
2. Сертификат DIN ISO
Система менеджмента качества фирмы Sartorius соответствует стандарту DIN EN ISO 9001, и сертифицирована Германской ассоциацией сертификации систем качества DQS.
3. Сертификат GMP
Производство и контроль качества питательных картонных подложек фирмы Sartorius AG полностью соответствует требованиям GMP.
Общие указания по работе
Общее методическое описание
Чтобы достичь показательных результатов микробиологического контроля, необходимо избегать ошибочных оценок при работе с микроорганизмами.
Поэтому в защищенном от тяги воздуха помещении нужно провести обработку пламенем горелки Бунзена. Перед началом работы, рабочее место протирают дезинфицирующим раствором (например: 70% спиртом).
Фильтрационную систему, пинцеты и ножницы перед применением стерилизуют обычным способом, при исследовательских работах, например обработкой пламенем.
Обращение с микроорганизмами
Культура микроорганизмов должна обрабатываться с большой тщательностью. Исследователь должен в любом случае действовать в соответствии с правилами санитарной гигиены, как будто бы он работал с патогенными микробами.
Обращение с микроорганизмами безопасно, когда соблюдаются следующие правила:
Поэтому в защищенном от тяги воздуха помещении нужно провести обработку пламенем горелки Бунзена. Перед началом работы, рабочее место протирают дезинфицирующим раствором (например: 70% спиртом).
Фильтрационную систему, пинцеты и ножницы перед применением стерилизуют обычным способом, при исследовательских работах, например обработкой пламенем.
Обращение с микроорганизмами
Культура микроорганизмов должна обрабатываться с большой тщательностью. Исследователь должен в любом случае действовать в соответствии с правилами санитарной гигиены, как будто бы он работал с патогенными микробами.
Обращение с микроорганизмами безопасно, когда соблюдаются следующие правила:
- основательное промывание рук до и после работы.
- на рабочем месте нельзя курить, есть или пить.
- культуры бактерий не должны храниться открытыми.
- материал бактерий нельзя брать руками.
- суспензию бактерий капают только с помощью пипетки и ни в коем случае не ртом.
- рабочие приборы, которые находятся в соприкосновении с бактериями, должны быть стерилизованы обжигом до и после работы.
- питательные среды, во избежании инфекции или заражения людей или животных, после их использования, перед очисткой или выбрасыванием должны быть дезинфицированы; например: с использованием дезинфицирующих средств или автоклавированием в соответствующих резервуарах.
Неточное соблюдение инструкции по применению приводит к неудовлетворительным результатам
1. Рост затруднен, колоний мало – сухая картонная подложка: было употреблено слишком малое количество воды.
2. Колонии расплываются - картонная подложка сырая, водная пленка на мембранном фильтре: излишек воды. Колонии подвижных микроорганизмов (бацилл, Proteus и др.) расплываются часто также при правильной добавке воды; примесь NaCl, эмульгатор или подобное затрудняют это явление.
3. Нестерильность снизу: рост колоний затруднен, помутнение излишка воды, встречается выцветание картонной подложки.
а) мембранный фильтр с решетчатой сеткой перевернут снизу вверх.
б) нестерильность пропитывающей воды (раствора).
в) инфекция во время установки (воздушная инфекция, инфекция при контакте).
г) смытые с мембранного фильтра микроорганизмы при неполном вакуумировании промывочной
жидкости или наклонное положение чашки Петри.
д) нестерильный фильтрационный стол.
е) нестерильный пинцет.
б) нестерильность пропитывающей воды (раствора).
в) инфекция во время установки (воздушная инфекция, инфекция при контакте).
г) смытые с мембранного фильтра микроорганизмы при неполном вакуумировании промывочной
жидкости или наклонное положение чашки Петри.
д) нестерильный фильтрационный стол.
е) нестерильный пинцет.
4. Односторонний рост – косостоящая чашка Петри в температурном шкафу.
5. Слишком густая или тонкая загрузка (оптимально от 20 до 200 микроорганизмов на фильтре) – неправильно выбрано разбавление или недостаточная фильтрационная масса.
6. Неравномерная загрузка – объем пробы ниже 5 мл отфильтрован без несущей среды или недостаточно смешан с ней.
Документирование
Мембранный фильтр, подверженный инкубации и который должен быть засвидетельствован в документации, должен находиться на фильтровальной бумаге в сушильном шкафу, разогретом до 80ºС в течение 30 минут. Таким образом, достигается надежное уничтожение всех вегетативных форм микроорганизмов. По Вашему запросу, отпечатанный протокол исследования находится в Вашем распоряжении для документирования. Наклейка мембранного фильтра производится с помощью клея, не содержащего растворителей. Для надежности фильтр должен быть заклеен широкой прозрачной лентой или помещен в целлофановую обертку.
Примеры описания и оценка роста
| ”Стандарт ТТС” - Питательные подложки (Тип 14055) | ”Стандарт” - Питательные подложки (Тип 14064) | ”Касо” - Питательные подложки (Тип 14063) |
| Среда из мясного экстракта и пептона (обезвоженный питательный бульон) для определения числа колоний (общее количество CFU); соответствующая положению по питьевой воде “Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater”, 1998 г, модифицированная добавкой ТТС. |
Среда из мясного экстракта и пептона (обезвоженный питательный бульон) для определения числа колоний (общее количество CFU); соответствующая положению по питьевой воде “Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater”, 1998 г. |
Питательная среда из казеина и пептона соевой муки для изоляции микроорганизмов и для определения общего количества CFU в соответствии с “USP 25, Немецкий закон по питьевой воде и ISO 9308-1”. |
| Прилагаемый в комплекте мембранный фильтр: 0.45μm, зеленый с зеленой сеткой (тип 13806) |
Прилагаемый в комплекте мембранный фильтр: 0.45μm, зеленый с зеленой сеткой (тип 13806) |
Прилагаемый в комплекте мембранный фильтр: 0.45μm, зеленый с зеленой сеткой (тип 13806) |
| Условия инкубации: 48 часов при температуре 30ºС. Согласно положению, возможны отклонения по времени и температуре инкубирования в зависимости от типа исследуемого материала. |
Условия инкубации: 48 часов при температуре 30ºС. Согласно положению, возможны отклонения по времени и температуре инкубирования в зависимости от типа исследуемого материала. |
Условия инкубации: 24-27 часов при температуре 30-37ºС, в зависимости от исследуемого материала. |
| Оценка: На этой питательной среде наблюдают преимущественно бактерии. Их колонии окрашиваются с помощью ТТС преимущественно в красный цвет. |
Оценка: На этой питательной среде наблюдают преимущественно бактерии. Морфология и цвет их колоний изменяются. |
Оценка: В зависимости от микробов, которые будут обнаружены, эта среда может быть преобразована в селективную, смешивая жидкость с добавками перед смачиванием подложки. При добавке к смачивающей жидкости 10% сыворотки растет также ряд взыскательных патогенных бактерий, например: представители групп пневмококка, neisseria, стерптококка, корниебактериум, ерызипелотрикс, и бруцелла. |
| Подсчет общего числа колоний | ||
|
|
|
|
Примеры описания и оценка роста
| ”Дрожжевой экстракт” - Питательные подложки (Тип 14090) |
”R2A” - Питательные подложки (Тип 14084) | ”Chromocult” - Питательные подложки (Тип 14087) |
| Для определения числа колоний (CFU) в питьевой воде, воде в емкостях или бутылках для питья я и минеральной воды, соответствует Немецкому закону по питьевой воде и ISO 6222. | Для обнаружения общего числа колонии heterotrophic микроорганизмов и для подкультивирования бактерий в питьевой воде. Соответствующая положению по питьевой воде “Standard Methods for the Examination of Water and Waste Water and EP” 1998г. Оптимальный рост для бактерий, которые приспособились к специфическим условиям жизни воды с низкими питательными веществами. |
Для определения общего количества колиподобных и E.Coli в воде и продуктах питания. |
| Прилагаемый в комплекте мембранный фильтр: 0.45μm, зеленый с зеленой сеткой (тип 13806) |
Прилагаемый в комплекте мембранный фильтр: 0.45μm, зеленый с зеленой сеткой (тип 13806) |
Прилагаемый в комплекте мембранный фильтр: 0.45μm, белый с черной сеткой (тип 11406) |
| Условия инкубации: 44 ± 4 часов при температуре 36ºС ± 2ºС ; 68 ± 4 часов при температуре 22ºС ± 2ºС по EN ISO 6222. |
Условия инкубации: 72 часа при температуре 35ºС; 5 дней при температуре 20ºС или 28ºС |
Условия инкубации: 24 часа при температуре 36ºС ± 1ºС ; Более длительное время инкубация затрудняет подсчет колоний. |
| Оценка: Могут расти бактерии, дрожжи и грибы. Из-за не окрашивания большинство колоний, преобладающе бактерии, становятся бесцветными |
Оценка: Преобладают колонии различного размера и цвета, преобладающе белые или бесцветные < диаметром 1 мм. |
Оценка: Е.coli образуют от темносиних до фиолетовых колоний. Колиподобные бактерии от красных к колониям salmone. Прочие энтеробактерии и грамм отрицательные бактерии образуют бесцветные колонии. Немногие с β-Glucuronidase активностью слегка синие. Для подтверждения E.Coli добавить реактив Kovacs к темно синим колониям. Затем E. coli имеют вишнево-красную окраску |
| Подсчет общего числа колоний E.coli и колиподобные | ||
|
|
|
|
Примеры описания и оценка роста
| ”Эндо” - Питательные подложки (Тип 14053) | ”M-FC” - Питательные подложки (Тип 14068) | ”Типол” - Питательные подложки (Тип 14067) |
| Избирательная среда для обнаружения Е.coli и колиподобных бактерий. Рецептура согласно положению по питьевой воде “Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater” 1998г. | Для обнаружения E. coli и фекальных колиподобных бактерий по “Geldreich” и др., по рекомендации “Стандартные методы для исследования питьевой воды и сточных вод” (”Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater”) 1998г. | Для обнаружения E. coli и фекальных колиподобных бактерий по Burman, N.P. (1967). |
| Прилагаемый в комплекте мембранный фильтр: 0.45μm, белый с зеленой сеткой (тип 13906) |
Прилагаемый в комплекте мембранный фильтр: 0.45μm, белый с зеленой сеткой (тип 13906) |
Прилагаемый в комплекте мембранный фильтр: 0.45μm, белый с зеленой сеткой (тип 13906) |
| Условия инкубации: 24 часа при температуре 37ºС. |
Условия инкубации: 20 ± 4 часа при температуре 37ºС в инкубаторе или при 44,4ºС в водяной бане. |
Условия инкубации: 18 - 24 часа при температуре 37ºС. |
| Оценка: Е.coli и колиподобных бактерии проявляются в качестве четко очерченных темно-красных колоний, Е.coli с зеленоватым металлическим блеском и темно-красными точками на нижней стороне мембранного фильтра. |
Оценка: E.Coli и колиподобные образуют синие колонии с диаметрами 1-2 мм; колонии других цветов не оцениваются. |
Оценка: E. Coli и колиподобные бактерии образуют желтые колонии диаметром 1-2 мм, окруженные желтой зоной. Бактерии, которые не сбраживают лактозу, образуют темно-красные колонии различной величины |
| E.coli и колиподобные | ||
|
|
|
|
Сравнение роста
Из-за разницы в распределении пор, далеко не все мембранные фильтры гарантируют достаточную пропитку средой. Сравнение мембран фирмы Sartorius из нитрата целлюлозы с мембранами из смешанных сложных эфиров (Ester) показывает существенные различия в росте.
На мембране из смешанных сложных эфиров (Эстар) E.Coli не проявляют никакого металлического блеска. В данном случае очень трудно дифференцирование между E.coli и колиподобными без дальнейшего испытания. Количественная оценка затруднена.
Псевдомоны растут как синие колонии с синим фоном, которые ясно показаны на мембране Sartorius из нитрата целлюлозы. На мембране из смешанных сложных полиэфиров выросло меньшее количество колоний и без синего фона. Здесь, из-за разницы в распределении пор, мембрана не гарантировала достаточную пропитку питательной средой. Это может стать причиной ложных отрицательных результатов.
На мембране из смешанных сложных эфиров (Эстар) E.Coli не проявляют никакого металлического блеска. В данном случае очень трудно дифференцирование между E.coli и колиподобными без дальнейшего испытания. Количественная оценка затруднена.
Псевдомоны растут как синие колонии с синим фоном, которые ясно показаны на мембране Sartorius из нитрата целлюлозы. На мембране из смешанных сложных полиэфиров выросло меньшее количество колоний и без синего фона. Здесь, из-за разницы в распределении пор, мембрана не гарантировала достаточную пропитку питательной средой. Это может стать причиной ложных отрицательных результатов.
| Подробности: |  mikrobiologi.pdf |
